Réparation des cassures double brin, stress réplicatif et intégrité du génome

L'équipe étudie, au niveau mécanistique, les principales voies de réparation des cassures double brin et des lésions bloquant la réplication, en particulier la recombinaison homologue et la jonction d'extrémités non homologues (NHEJ). Nous combinons des approches de biologie moléculaire et de génétique pour étudier la régulation de ces voies dans les cellules. En parallèle, nous employons des stratégies méthodologiques originales, notamment la microscopie électronique (EM) et la microscopie à force atomique (AFM) pour analyser les facteurs de réparation de l'ADN lors de réactions biochimiques reconstituées, ainsi que pour visualiser des intermédiaires d'ADN enrichis à partir de cellules. Nous avons également développé des techniques de cryo-EM permettant de déterminer les structures de complexes nucléoprotéiques essentiels à la réparation de l'ADN, afin de mieux comprendre les mécanismes moléculaires qui maintiennent la stabilité du génome.

1. Cryo-EM des fourches de réplication avec RAD52 et RAD51: Nous caractérisons les interactions de RAD51 et RAD52 sur des fourches de réplication purifiées afin de comprendre leurs modes de liaison, la formation de filaments mixtes et leur rôle dans la protection des fourches en stress réplicatif.

2. Machinerie NHEJ: La cryo-EM nous a permis de déterminer la structure hélicoïdale des filaments XRCC4, révélant leur fonction d'échafaudage pour la voie NHEJ et d'ancrage pour d'autres partenaires cellulaires.

3. Études structurales de BRCA2, RAD51, FIGNL1 et RAD54: Nous résolvons des structures cryo-EM de peptides issus de FIGNL1 ou RAD54 liés à RAD51 ou DMC1 afin de définir les interactions essentielles et d'évaluer l'impact de mutations.

4. Régulation des facteurs HR par dégrons: Dans le cancer de l'ovaire, nous identifions les signaux de dégradation modulés par le stress réplicatif et analysons leur impact sur les niveaux de protéines HR, afin d'explorer leur potentiel comme cibles thérapeutiques.